研究原位克隆肿瘤的方法
发布日期：2017-06-05由于果绳宿主有一个开放性循环系统，细胞有可能在不跨越组织障碍的情况下从注射部位迁移，接受肿瘤组织移植的宿主可能具有被动和主动迁移细胞的混合。去美国看病服务机构爱诺美康介绍到，因此，对移植转移分析作了进一步修改，以观察宿主卵巢管中的微转移来专门研究具有侵袭行为的细胞这种方法可以用来显示来源于lgl和brat组织有不同特性的转移瘤。例如，卵巢管被Igl肿瘤细胞入侵的频率随着体内培养时间上升，然而来源于brat肿瘤的微转移则不会如此。
来源于致死巨人症幼体、脑瘤和discs large移植产生的继发肿瘤，携带miranda基因突变体克隆的脑碎片或突变体脑碎片在植人两周后体积增长了数倍，一大团植人组织（绿色）在宿主中,一个较小的定植肿瘤（黄色箭头）分布在距离初始植入位点（黑色箭头）较远的位置。
去美国看病机构介绍：此外，在神经细胞标记表达中，研究者发现，来源于lgl和bmt肿瘤的转移细胞是不同的，来源于lgl组织的转移细胞共表达神经元和神经胶质细胞标记，而大多数brat转移细胞不表达其中任何一个。这表明，虽然Lgl和Brat蛋白都是通过将神经母细胞分裂的平衡状态转变为过度自我更新，从而打乱神经细胞分裂，但转移瘤的分子特性却不同。
移植实验的另外一个改进，是将肿瘤细胞用绿色荧光蛋白(GFP)标记，以区分成体宿主中的肿瘤细胞。正如前面所示，极性决定因素Pin和Mimnda的突变会导致肿瘤发生。这些肿瘤转移，通过注射位点的远端荧光定位，月中瘤可以在活体内可视化，并重新获得活的GFP阳性细胞。去美国看病服务机构爱诺美康介绍到，重要的是，不经染色可以将生物分子从肿瘤细胞中分离。
另外一个在果蝇中模拟转移的方法是检查肿瘤细胞的原位转移。与移植模型相反，从有机体中分离出一块肿瘤组织，其中所有细胞的肿瘤抑制基因失活。这种原位方法需要在其他正常组织中产生缺乏特定肿瘤抑制基因的细胞标记克隆。这些细胞在特定条件下在有机体内转移。
去美国看病服务机构爱诺美康介绍到，肿瘤模型中的细胞克隆模仿了人类癌症，其肿瘤细胞与正常细胞相邻，接受正常细胞环境的信号。当肿瘤抑制基因scribble的突变体克隆生长在幼虫的眼成虫器上，则突变体克隆不会过度生长。这与scribble突变体幼虫相反,scribble突变体幼虫显现肿瘤的成虫盘大脑。然而，当与致癌基因ras和notch突变结合时，scrib克隆确实生长了。
这种研究原位克隆肿瘤的方法可用于鉴别促进非侵袭性细胞团成为可以远处播散肿瘤的基因。一项研究使用了这个方法，发现scrib基因的突变以及肿瘤抑制基因lgl和dig的突变，可导致RW12肿瘤的发展。这些突变可以导致大的原发瘤并向远处转移，远处转移可以通过GFP 标记突变体克隆实现可视化。在这个系统中，肿瘤抑制基因不能引起转移肿瘤克隆，可能是由于scrib_克隆周围存在正常细胞。
一个重要的问题是，维持细胞极性和形态所必需的其他基因突变是否也会促进肿瘤生长。bazooka、stardust和cdc42的突变确实会促进Ras肿瘤的发展。这种检测果绳肿瘤细胞转移的方法已被其他研究采用。另外一个小组发现，RaS突变细胞Src水平高表达，导致转移性生长。作者提出在人类肿瘤中Src水平的高表达可能也与原癌基因mS发展结合而促进转移。
转移性肿瘤细胞的一个标志性特征是运动能力的增力口。一个研究细胞迁徙行为的成熟果蝇模型是卵室边界细胞模型。去美国看病机构介绍，发育中卵室的关键形态发生事件是一群上皮细胞进行特征性的迁移，这种细胞叫做边界细胞。在发育过程的特定点，一种叫做极细胞的特殊卵泡细胞,从前上皮毛表面受体的表达,这通常需要精确的时间和空间迁移控制。可能在通过控制很多细胞表面的内吞受体而调节肿瘤细胞活性方面发挥相似的作用。支持这一假说的是，发现溶血磷脂酸受体EDG2在nm23-Hl突变的乳腺癌转移细胞中高表达。
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